La cicatrisation des plaies chroniques, telles que les ulcères ou les brûlures, constitue un enjeu majeur de santé publique en raison des complications invalidantes qu’elles peuvent engendrer. Face aux limites des traitements actuels, les médecines traditionnelles offrent des alternatives intéressantes, alliant efficacité potentielle et faible coût. La médecine traditionnelle japonaise, ou Kampo, propose des formulations topiques utilisées depuis des siècles pour favoriser la régénération cutanée. Parmi elles figurent les pommades Shiunkō (紫雲膏), Chuōkō (中黄膏) et Shinsen taitsukō (神仙太乙膏), préparées à partir d’une base huileuse et cireuse, dans laquelle l’huile de sésame permet l’extraction de plantes médicinales. Ces préparations comprennent entre deux et sept drogues végétales, issues notamment des genres Angelica, Cinnamomum, Curcuma, Lithospermum, Phellodendron, Rheum, Paeonia, Rehmannia et Scrophularia. Si plusieurs de ces ingrédients ont été étudiés pour leurs effets cicatrisants, peu de recherches se sont intéressées aux extractions lipophiles, pourtant susceptibles de modifier significativement les métabolites présents.Cette thèse vise à explorer par une approche rationnelle la diversité des pommades Kampo en prenant en compte plusieurs paramètres : les protocoles d’extraction (macération, chauffage modéré, chauffage intense), la diversité botanique des drogues végétales employées (espèces et genres variables selon les pratiques), ainsi que l’origine géographique et les conditions de préparation des matières premières. Ces éléments influencent fortement la composition chimique, en raison de la sensibilité des plantes et de leurs métabolites aux facteurs biotiques et abiotiques ; avec un impact potentiel sur les effets biologiques.Pour explorer cette variabilité, plusieurs centaines d’extraits huileux ont été préparés selon des protocoles représentatifs des pratiques Kampo au Japon, en variant température d’extraction, taxons botaniques et origines. Les extraits ont été analysés par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse (LC-MS et LC-MSMS) en approche non ciblée, puis testés sur un modèle in vitro de kératinocytes humains immortalisés. Deux paramètres de cicatrisation cutanée ont été évalués : la migration cellulaire (via test de blessure) et la prolifération (via test d’incorporation au 5-ethynyl-2´-deoxyuridine ou EdU). L’étude de ces matrices huileuses complexes a soulevé plusieurs contraintes expérimentales, notamment sur la solubilité des extraits pour les tests biologiques. Malgré cela, la caractérisation métabolomique a permis de mettre en évidence l’impact majeur des conditions d’extraction : les chauffages à hautes températures (> 200 °C) modifient drastiquement les métabolites présents, avec entre autres une dégradation notable des tocophérols et phytostérols. Des variations significatives ont également été observées selon l’origine géographique des plantes, notamment concernant la teneur en terpènes glycosylés pro-cicatrisants chez l’Angelica acutiloba. En revanche, ni la température d’extraction ni l’origine n’ont montré d’effet significatif sur la migration ou la prolifération cellulaire dans ce modèle. Seules les formules complètes Shiunkō et Shinsen taitsukō ont induit un ralentissement de la migration des kératinocytes, comparé aux extraits impliquant un seul ingrédient. Certains métabolites, annotés de manière probabiliste, tels que des diterpènes estérifiés spécifiques à la formule Shinsen taitsukō, pourraient être impliqués.Ce travail met en lumière la complexité chimique et biologique des pommades Kampo. Il souligne la nécessité d’approches intégrées pour affiner l’annotation des métabolites lipophiles et mieux comprendre leurs effets, notamment à l’aide de modèles cutanés avancés. De nouvelles expérimentations devraient permettre de surmonter les obstacles liés à la nature lipophile des extraits, tout en offrant des conditions plus représentatives de la physiologie humaine.